口腔科学论文_HOXC10基因对体外人牙髓干细胞增

文章目录

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.2 方法

    1.2.1 人牙髓干细胞分离培养及实验分组

    1.2.2 细胞成脂诱导

    1.2.3 qPCR检测细胞中HOXC10、PPARγ、C/EBP-αmRNA的表达水平

    1.2.4 MTT检测细胞增殖

    1.2.5 Transwell小室实验检测细胞迁移

    1.2.6 酶标仪检测细胞黏附能力

    1.2.7 Western blotting检测HOXC10、PPARγ、C/EBP-α、WNT通路相关蛋白GSK3β、β-catenin的蛋白表达

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 人牙髓干细胞诱导成脂分化过程中HOXC10基因表达

2.2 沉默HOXC10对人牙髓干细胞活性的影响

2.3 沉默HOXC10对人牙髓干细胞迁移和细胞黏附的影响

2.4 沉默HOXC10对人牙髓干细胞对成脂分化的影响

2.5 沉默HOXC10对人牙髓干细胞WNT通路的影响

3 讨论

文章摘要:目的:探讨HOXC10基因对体外人牙髓干细胞增殖和成脂分化的调控作用及其分子机制。方法:原代分离培养人牙髓干细胞,分别将si-HOXC10、si-con转染至人牙髓干细胞,分别记作si-HOXC10组、si-con组,未经转染的人牙髓干细胞记作NC组,同时将人牙髓干细胞进行成脂诱导。q PCR与Western blotting分别检测HOXC10 mRNA及蛋白表达量;采用Western blotting检测成脂诱导后细胞中过氧化物酶体增殖因子活化受体γ（PPARγ）、重组人CCAAT增强子结合蛋白-α（C/EBP-α）蛋白水平。甲基噻唑基四唑（MTT）检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移能力;采用酶标仪检测细胞的黏附能力;Western blotting检测沉默HOXC10对PPARγ、C/EBP-α、WNT通路相关蛋白糖原合成酶激酶-3（GSK3β）、β-连环蛋白（β-catenin）表达的影响。结果:与培养前相比,成脂分化诱导后人牙髓干细胞中HOXC10 mRNA及蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,PPARγ、C/EBP-α的表达水平显著降低（P<0.05）;与si-con组相比,si-HOXC10组人牙髓干细胞活性显著降低（P<0.05）;相较于si-con组,si-HOXC10组人牙髓干细胞迁移细胞数显著增多（P<0.05）,细胞黏附能力显著升高（P<0.05）;与si-con组相比,siHOXC10组人牙髓干细胞中PPARγ、C/EBP-α的表达水平显著降低（P<0.05）;与si-con组相比,si-HOXC10组人牙髓干细胞WNT通路中GSK3β蛋白水平显著降低（P<0.05）,β-catenin蛋白水平显著升高（P<0.05）。结论:沉默HOXC10基因可抑制人牙髓干细胞增殖及成脂分化,其作用机制可能是通过激活WNT通路而发挥作用。

文章关键词:

论文DOI:10.16190/j.cnki.45-1211/r.2021.09.010

论文分类号:R781.31

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